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10-21高效液相色譜系統（HPLC）作為現代分析化學的核心技術之一，其精密的儀器構成實現了復雜樣品的高效分離與精準檢測。這個復雜的分析系統由多個功能互補的組件協同工作，共同完成從進樣到數據輸出的完整分析流程。一、輸液系統：流動相的動力源泉輸液系統是HPLC的"心臟"，由高壓輸液泵和脫氣裝...
1、氣泡溢出流動相內有氣泡，關閉泵，打開泄壓閥，打開purg鍵，清洗脫氣，氣泡不斷從過濾器冒出，進入流動相，無論打開purge鍵幾次，都無法清除不斷產生的氣泡。原因過濾器長期沉浸于乙酸銨等緩沖液內，過濾器內部由于霉菌的生長繁殖，形成菌團，阻塞了過濾器，緩沖液難以流暢地通過過濾器，空氣在泵的壓力作用下經過濾器進入流動相。處理過濾器浸泡于5%硝酸溶液中，超聲清洗幾分鐘即可；亦可將過濾器浸泡于5%硝酸溶液中12～36小時，輕輕震蕩幾次，再將過濾器用純水清洗幾次，打開泄壓閥，打開pu...
進樣閥在進樣過程中，必須是非常清潔的，否則得不到較好的結果。進樣閥切換到進樣位置(Inject)后，要在此位置保持一段時間，使活動相充分沖洗樣品定量管，這樣可以保證有較高的度，而且不用另外再沖洗樣品定量管。這種由色譜儀器控制的沖洗顯然要比手動沖洗更好些。留意：沖洗需要的活動相體積至少為所進樣品體積的10倍。例如，假如取20μL樣品至100μL樣品定量管中，而活動相此時的流速為1mL/min，則需要在進樣位置至少保持12s，即：20μL×10/1000μL·min-1=0.2m...
常見故障液相色譜儀系統可能出現的故障是：1.流動相脫氣不充分；2.流動相供給不暢；3.流動相和貯液器被污染等。一、流動相脫氣不充分流動相受熱，或者流動相不同組分混合時會有氣體產生，氣泡進人泵內引起壓力波動，增加噪音，色譜圖上出現毛刺。可試用下列方法解決問題流動相再脫氣采用更有效的脫氣方法(如通氮氣保護)或兩種方法配合使用改系統內混合為系統外低壓預混合。如果仍有毛刺，應考慮在檢測器后面加阻尼器。二、流動相供給不暢流動相供給不暢可能的原因是流動相已接近用完了，管路中吸人氣體引起泵...
制備液相色譜中，有三個可以觀察到的狀態：柱壓、檢測器基線、譜圖。通過觀察和記錄這三個狀態可以監測儀器是否正常。若某個狀態出現異常，故障排查和解決方案如下。1、柱壓波動1）吸液管路進氣泡①溶劑不足，吸濾頭吸入空氣，添加溶劑并排氣泡。②吸濾頭臟了或堵塞，用異丙醇（或5%稀硝酸）清洗。③溶劑中有氣泡（尤其兩種以上溶劑混合），超聲（或抽濾）脫氣。2）泵流量不穩①單向閥堵塞，大流速purge，若不能解決，則需拆下單向閥（異丙醇）超聲清洗清洗或更換單向閥。②柱塞密封圈磨損，更換密封圈。③...
1.及時清洗色譜系統平時分析好樣品，清洗好色譜柱后，用一根PEEK管連接在原先接色譜柱位置，用脫氣的純水以1.5mL/min流速清洗1.5小時，后用甲醇用同樣條件清洗。自動進樣器清洗液換上甲醇，打開排液閥，用針筒抽吸越50mL，再關閉排液閥，purge，rinse各三次，結束后按shift，9，關閉自動進樣器。純水清洗色譜系統能清除管路中殘存的緩沖鹽，甲醇清洗，防止系統滋生細菌和微生物堵塞管路，也可以洗去不溶于水的物質。2.定期更換Septumcutout定期更換Septum...
液相色譜系統主要由貯液瓶、泵、進樣器、柱子、柱溫箱、檢測器、數據處理系統組成。對于整個系統而言，柱子、泵和檢測器是核心部件同時也是易出問題的主要部位。液相色譜柱常見故障排除方法：1、若操作過程發現壓力很小，則可能管件連接有漏，注意檢查。當出現錯誤警告(各組件指示燈均為紅色)，一般為漏液，其中一個感應器中已有溶劑，漏液故障排除后，擦干，點擊Online操作界面中的Instrument/SystemOff，然后再點擊操作界面中的Instrument/SystemOn即可。2、連接...
制備型加壓液相色譜，按照色譜柱和樣品量的大小，分為：（1）低壓液相色譜；（2）中壓液相色譜；（3）高壓液相色譜；（4）快速色譜。低壓、中壓與高壓液相色譜的壓力范圍之間會存在一定交疊，沒有統一、明確的標準。1.快速色譜柱壓通常為2bar（或30psi）左右，對于那些容易分離的簡單混合物，由于快速色譜具有操作簡便、經濟等優點，常常是實驗室的。但快速色譜不同于一般的層析分離，這種分離沒有壓力，而快速分離通常使用瓶裝氮氣加壓，使流動相具有一定的流速，從而縮短了分離時間。快速色譜使用的...
液相柱是消耗品，會隨使用時間或進樣的次數增加，出現色譜峰高降低，峰寬加大或出現肩峰，柱效下降，需要定期進行*清洗和再生。1、反相柱分別用甲醇：水＝90：10、純甲醇、二氯甲烷等溶劑著流動相，依次沖洗，每種流動相流經色譜柱不少于20倍的色譜柱體積。然后再以相反的次序沖洗。2、正相柱分別用正己烷、異丙醇、二氯甲烷、甲醇等溶劑做流動相，順次沖洗，每種流動相流經色譜柱不少于20倍的柱體積（異丙醇粘度大，可降低流速，避免壓力過高）。注意使用溶劑的次序不要顛倒，用甲醇沖洗完后，再以相反的...
